2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、Y1057399分類號UDC$852723密級編號中國農業科學院博士后研究工作報告斯氏艾美耳球蟲MIC5基因的篩選、表達及重組蛋白免疫原性研究喬軍工作完成日期2005年8月2007年7月報告提交日期2007年7月中國農業科學院研究生院家畜疫病病原生物學國家重點實驗室2007年7月AbstractOccidiosisiSakindofsporozoaldiseasesinrabbitscausedbycoccidianofEimeriid

2、ae,whichhasposedagreatthreattabbitbreedingindustryinofircountryInthispaper,thefollowingstudiesoninvestigationofcoccidiaspeciesofrabbitsinlanzhouisolationofpurespecieofEstiedaibycoccidiafreerabbitandsingicoocysttechniques

3、。constructionofcDNAlibraryofsporozoitesofE。stied口iscreeningandexpressionofmicronemeprotein5(EsMIC51toassayimmunogenicityofrecombinantproteinMIG5wereconductedTheresultscarlbesummarizedasfollows:Firstly,14coceidiaspeciesof

4、Eimeriawereobservedinthissurvey,whichwereEstiedaiEmediaEmagnaEirrestiduaEpiriformisEexigua,EintestinalisEcoecicolaEneoleporis最nagpurensisEper[oransE1eporisEflsvescensandEmatsubayashitThedominantcoceidianspeciesinrabbitsa

5、reEperforans(212%、Eirrestidua(10O%)andEstiedai(90%),respectivelyn圮infectionrateofEimeriacoceidianWas100percentforrabbitsof14monthsofageSecondlytheeDNAlibraryofsporozoitesofEstiedaiwassuccessfullyconstructed,whichconsiste

6、dof62x10sindependentcloneswitharecombinationrateof949%Theinsertedfragmentswere5001500bpinlengthThirdlytwopositiveplaqueswhichharboring1095bpeDNAfragmentwerescreenedbytheBentonDavishybridizationtechniquefromtheeDNAlibrary

7、Sequenceanalysisrevealedthatthegenefragmentshared891%identitiesinnucleotidesequencewiththesameregionofEtMIC一5gene,harboring903bpencodingre#on,174bp3’UTRand17bppoly(A)tail4appledomains(Adomains)werefoundinitsdeducedaminoa

8、cidsequenceFounhlyEsMIC一5wassuccessfullyexpressedinEcolitransformatedbyprokaryoticexpressionvectorpETMIC5TheexpressedrecombinantproteinMIC一5WaspurifiedwithNi“ioncolumnFifthlyrabbitIFN—ygeneWasamplifiedbyRTPCRTherecombina

9、ntIFNYWasexpressedinBHKtransfectedbyeukaryoticexpressionvectorpVAXIFNYwithliposomeSixtMyMIC5proteinwassuccessfullyexpressedinPichiapastorisintheformofsecretionproteinandprovedtobeagoodimmunogenicityinimmunizedmiceLast,ba

10、sedontheimmunizationoftwentycoccidia—freerabbits,theresultsshowedthattherecombinantproteinEsMIC5couldefficientlyinducespecifichumoralandcellularimmuneresponsesagainstEstiedaiKeywords:Estiedai,Sporozoites,eDNAlibraryMicro

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